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 什么是MRD

MRD，即分子殘留病灶（亦稱(chēng)微小殘留病灶或可測量殘留病灶），其概念源于血液腫瘤，是指經(jīng)過(guò)治療后，影像學(xué)或傳統實(shí)驗室方法不能發(fā)現，但通過(guò)液體活檢發(fā)現的腫瘤來(lái)源分子異常（外周血可穩定檢出豐度≥0.02%的ctDNA，包括驅動(dòng)基因或其他的I/II類(lèi)基因變異），代表著(zhù)腫瘤的持續存在和臨床進(jìn)展可能^[1]。廣義上說(shuō)，MRD的檢測內容可包含體液（常見(jiàn)為血液）中來(lái)源于腫瘤細胞的特異性標志物，包括但不限于ctDNA、ctRNA、CTC、外泌體及其他物質(zhì)，檢測范圍包括了基因組學(xué)和蛋白組學(xué)^[2][3]。基于NGS的ctDNA突變檢測是目前實(shí)體瘤MRD檢測最常用的方法。在結直腸癌、非小細胞肺癌和乳腺癌中，有充分證據表明MRD具有預后分層作用，臨床價(jià)值較明確;在胰腺癌、肝癌、食管癌、胃癌等其它實(shí)體瘤中，也有一些證據提示MRD具有預后分層作用^[4]。

那么，MRD到底什么時(shí)候做？怎么做？本文將分兩期通過(guò)MRD的分析策略、Landmark檢測時(shí)間點(diǎn)、臨床意義、檢測難點(diǎn)等方面進(jìn)行闡述。

MRD的分析策略

實(shí)體瘤MRD檢測根據是否參考腫瘤組織突變信息分為腫瘤組織先驗分析（tumor-informed）和腫瘤組織未知分析（tumor-agnostic/naive）兩種分析策略。

腫瘤組織先驗分析（Tumor-informed assays）需要對腫瘤組織進(jìn)行WES（或大panel）+個(gè)性化panel的檢測。腫瘤組織先驗（Tumor-informed）策略首先需要對患者的腫瘤組織進(jìn)行高通量測序（以WES為主），確定每位患者的腫瘤特異突變，并且選擇一定數量的高豐度的軀干突變定制個(gè)性化panel（通常只包括16~50個(gè)腫瘤特異突變），最后在患者血漿ctDNA中檢測這些突變，相當于WES（或大panel）+個(gè)性化panel的檢測。該分析策略因檢測突變靶點(diǎn)少，大幅降低了由于技術(shù)和生物背景（比如克隆性造血）導致的假陽(yáng)性風(fēng)險，也因此可以進(jìn)行極高深度的測序，提高檢測的靈敏度。目前市場(chǎng)上MRD產(chǎn)品多基于此策略。

Tumor-informed還有一種固定panel檢測策略：在基線(xiàn)組織檢測后，后續監測使用固定Panel。Panel通常基于常見(jiàn)驅動(dòng)基因和靶向藥物作用位點(diǎn)進(jìn)行設計，這限制了其適用性，市場(chǎng)上較少見(jiàn)到。

腫瘤組織未知分析（tumor-agnostic/naive）不需要獲取腫瘤組織，直接進(jìn)行固定化panel檢測。該策略主要是用一個(gè)普適性、一般有三四百個(gè)基因甚至更多基因的大panel進(jìn)行檢測，相當于固定化panel的檢測。采用固定的突變panel，無(wú)須預先獲取患者腫瘤組織進(jìn)行測序，可以大幅簡(jiǎn)化流程、降低成本及縮短患者M(jìn)RD狀態(tài)評估周期。在制定患者輔助治療的決策過(guò)程中，輔助治療的延遲可能會(huì )降低治療療效，因此快速評估患者M(jìn)RD狀態(tài)，從而盡早進(jìn)行臨床決策也十分重要^[5]。

這兩種策略孰優(yōu)孰劣呢？

三種策略對比^[6][7]

MEDAL研究是全球首個(gè)早期肺癌頭對頭對比三種MRD檢測策略的前瞻性臨床研究，該研究中，所有選擇的變異中有98.2%是非標準的，其中99.9%是唯一存在于一個(gè)患者中的。如果只監測標準的突變，近一半landmark（治療后的單個(gè)時(shí)間點(diǎn)）的MRD陽(yáng)性樣本將無(wú)法識別。

同時(shí)發(fā)現PROPHET（Tumor-informed定制化Panel）在基線(xiàn)時(shí)對DFS和OS的預測能力高于Tumor-agnostic和Tumor-informed固定化Panel檢測。在實(shí)體瘤分子殘留病灶（MRD）檢測共識中也明確提到基于腫瘤組織突變的tumor-informed分析相對于tumor-agnostic/naive分析具有更好的敏感性和特異性，優(yōu)先考慮采用tumor-informed分析策略。

Landmark檢測時(shí)間點(diǎn)

01.新輔助治療

CTONG1804是一項前瞻性多中心II期研究基于PD-L1表達評估了新輔助nivolumab單藥（N）和nivolumab-化療（N/C）組合的臨床療效。

對38名患者在治療前收集的血漿樣本進(jìn)行分析，在89.5%(34/38)的治療前樣品中檢測到ctDNA，包括21.1%(8/38)的II期疾病和68.4%(26/38)的III期疾病。ctDNA檢出率在新輔助治療期間下降，從治療前(T0)的89.5%下降到新輔助治療后(T2)的34.2%，然后在手術(shù)后(T3)繼續下降到27.6%。具體來(lái)說(shuō)，新輔助免疫單藥N和N/C分別使ctDNA陽(yáng)性率降低42.9%(T3)和18.2%(T3)。

在所有局部和遠處復發(fā)的患者中，至少在一個(gè)點(diǎn)上觀(guān)察到可檢測的ctDNA。ctDNA/MRD–(T2和T3)患者與ctDNA/MRD+(T2或T3)患者的18個(gè)月EFS率分別為93.8%和47.3%。結果提示：新輔助治療和手術(shù)后兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的ctDNA陰性，可預測pCR和生存益處，需在前瞻性臨床試驗進(jìn)一步證實(shí)。

ctDNA/MRD –(T2和T3)患者與ctDNA/MRD+(T2或T3)患者的EFS^[8]

MRD對新輔助治療療效的評估價(jià)值在膀胱癌^[9]、結直腸癌^[10]、乳腺癌^[11]等也均已有文獻報道，現有證據提示新輔助治療后ctDNA清除對于預測遠處復發(fā)是潛在的有效標志物：若患者接受新輔助治療后ctDNA陽(yáng)性，則可能預后較差，不適合進(jìn)行器官功能保留，需考慮及時(shí)調整治療方案。基于ctDNA的MRD狀態(tài)評估可潛在輔助臨床篩選適合采用非手術(shù)治療方案的優(yōu)勢人群，為進(jìn)展期患者的精細化全程管理提供新思路。胃癌患者若接受輔助治療則建議在治療前接受MRD檢測，有助于判斷預后和制訂進(jìn)一步的治療隨訪(fǎng)策略；接受新輔助治療的局部進(jìn)展期胃癌患者在治療過(guò)程中可考慮行MRD動(dòng)態(tài)監測^[12]。

然而，術(shù)前ctDNA-MRD結果并不總是與其在術(shù)后的結果保持相關(guān)性，有研究發(fā)現，在47位復發(fā)非小細胞肺癌患者中，14例患者在術(shù)前MRD檢測結果為陰性，但在術(shù)后監測中卻為MRD陽(yáng)性^[13]。這表明術(shù)前ctDNA-MRD結果并不影響其在術(shù)后監測中的結論，且更加明確了術(shù)后MRD監測的重要性。

研究發(fā)現，患者術(shù)前ctDNA-MRD狀態(tài)與多個(gè)因素存在關(guān)聯(lián)，包括腫瘤大小、腫瘤分期、病理類(lèi)型、基因型等。具體來(lái)說(shuō)，腫瘤體積越大、分期越晚，其術(shù)前ctDNA-MRD陽(yáng)性率越高^[14][15]。關(guān)于術(shù)前ctDNA-MRD檢測的結果在預后方面的作用尚未達成一致的結論。術(shù)前ctDNA-MRD在不同癌種或不同病理類(lèi)型中存在異質(zhì)性，還需要更多研究明確其在不同癌種中的預后預測價(jià)值。

02.根治性治療之后，輔助治療之前

目前，MRD大多數首次檢測都在此時(shí)。

NCT02965391研究在手術(shù)前即刻(時(shí)間A)和腫瘤切除后多個(gè)預先指定的時(shí)間點(diǎn)[時(shí)間B(5分鐘)、時(shí)間C(30分鐘)和時(shí)間D(2小時(shí))]和手術(shù)后[時(shí)間P1(1天)、時(shí)間P2(3天)和時(shí)間P3(1個(gè)月)]獲得10毫升血漿樣品。腫瘤根治術(shù)后ctDNA迅速衰減。在術(shù)后1天時(shí)MRD陽(yáng)性和陰性患者的平均RFS和平均OS都無(wú)顯著(zhù)差異；而在術(shù)后3天和術(shù)后1個(gè)月時(shí)MRD陽(yáng)性和陰性患者的RFS和OS存在顯著(zhù)差異。提示術(shù)后3天和術(shù)后1個(gè)月的MRD檢測結果與患者的腫瘤復發(fā)和生存更為相關(guān)。

術(shù)后1天時(shí)MRD陽(yáng)性和陰性患者的平均RFS和平均OS^[16]

術(shù)后3天時(shí)MRD陽(yáng)性和陰性患者的平均RFS和平均OS^[16]

目前對于MRD基線(xiàn)分析采樣時(shí)機、檢測時(shí)機均未有統一標準，非小細胞肺癌分子殘留病灶專(zhuān)家共識推薦MRD首次檢測的時(shí)間窗在NSCLC根治性治療后1周到1個(gè)月之內。胃癌分子殘留病灶檢測與臨床應用中國專(zhuān)家共識（2023版）推薦進(jìn)展期胃癌在根治性手術(shù)后或術(shù)后首次隨訪(fǎng)時(shí)，可考慮行MRD檢測。美國專(zhuān)家建議手術(shù)后兩周采集初始血液樣本進(jìn)行基于ctDNA的MRD檢測，當為陰性結果后，可以縮短監測時(shí)間(如1個(gè)月后)進(jìn)行陰性結果的再確認，但應在輔助治療開(kāi)始前完成^[17]。

綜上并結合共識，筆者推薦實(shí)體瘤患者M(jìn)RD首次檢測點(diǎn)應在根治性手術(shù)之后1周至一個(gè)月內，輔助治療開(kāi)始之前；根治性放化療之后，鞏固治療之前或放療進(jìn)度一半時(shí)^[18]；系統治療后完全緩解的晚期患者為宜。術(shù)前檢測可評估新輔助治療效果，對預后的評估重點(diǎn)要看術(shù)后MRD狀態(tài)。

03.Longitudinal檢測延續時(shí)間

Longitudinal指在根治性治療后的一系列時(shí)間點(diǎn)上進(jìn)行連續性監測，如術(shù)后3個(gè)月、6個(gè)月等，以全面評估患者的疾病進(jìn)展可能和MRD狀態(tài)的動(dòng)態(tài)變化。在此期間患者的MRD結果均為陰性者，則定義為L(cháng)ongitudinal陰性；如果在任意監測時(shí)間點(diǎn)上，患者的MRD檢測結果為陽(yáng)性，則定義為L(cháng)ongitudinal陽(yáng)性。多個(gè)研究的匯總分析表明，術(shù)后Landmark單點(diǎn)MRD陽(yáng)性始終與患者的不良預后密切相關(guān)，特異性大于90%，但是敏感性相對較低，中位敏感性為56%。說(shuō)明Longitudinal的結果對患者分層具有更好的敏感性和特異性，文獻報道其敏感性達到了100%，中位敏感性為89%^[19]。上述結論表明：長(cháng)期動(dòng)態(tài)監控對于復發(fā)風(fēng)險的評估更準確。

在CIRCULATE-Japan研究中，研究者根據結直腸癌患者術(shù)后4周和12周的MRD檢測結果，將患者分為持續陽(yáng)性、陽(yáng)性轉陰性、陰性轉陽(yáng)性、持續陰性性四組，結果表明“陽(yáng)性轉陰性”組的DFS較“陽(yáng)性轉陽(yáng)性”組有顯著(zhù)提升（81.4%vs33.8%）。再次強調了長(cháng)期監控的重要性。

 四組的DFS比較^[20]

那么，Longitudinal要持續多長(cháng)時(shí)間？吳一龍教授團隊在晚期肺癌患者適應性降階治療研究中，患者的中位隨訪(fǎng)19.2個(gè)月，整體人群的中位無(wú)進(jìn)展生存期（PFS）為18.4個(gè)月^[21]。非小細胞肺癌的相關(guān)研究表明，術(shù)后12至18個(gè)月是MRD高峰檢測時(shí)間范圍。若患者維持MRD陰性超過(guò)18個(gè)月，復發(fā)的風(fēng)險就會(huì )逐步降低。

綜上，筆者建議患者每3~6個(gè)月進(jìn)行一次MRD檢測，持續至少2年。具體檢測時(shí)間可與患者返院隨訪(fǎng)時(shí)間結合。

亦有觀(guān)點(diǎn)認為對于1B期及以后的建議每3個(gè)月復查一次，到術(shù)后三年；對于1B期之前的患者術(shù)后建議3-6個(gè)月復查一次，同步隨訪(fǎng)MRD檢測。但未見(jiàn)其出處，僅供參考。

飛朔生物檢測策略

飛朔生物自主研發(fā)的實(shí)體瘤分子殘留病灶(MRD)檢測產(chǎn)品采用定制化Panel檢測策略，先對原發(fā)腫瘤組織進(jìn)行全面的全外顯子測序，確定患者特異的基因突變結果，然后定制個(gè)性化Panel對組織中的一定數量的突變位點(diǎn)進(jìn)行后續的ctDNA檢測。對比同類(lèi)產(chǎn)品優(yōu)勢明顯。

自主研發(fā)腫瘤版WES（全外顯子測序）檢測，在WES的基礎上增加腫瘤熱點(diǎn)突變區域、常見(jiàn)基因融合相關(guān)的內含子區域、非編碼區ClinVar致病性位點(diǎn)、SNP骨架和MSI區域的探針覆蓋；基線(xiàn)樣本檢測結果覆蓋導靶向治療，免疫治療和遺傳風(fēng)險評估；

個(gè)體化定制panel采用自研的單側引物擴增結合UMI的測序文庫構建技術(shù)；

自動(dòng)化監測位點(diǎn)篩選，通過(guò)突變位點(diǎn)的頻率，基因的功能，突變類(lèi)型和突變等級等指標加權評分，從位點(diǎn)的篩選提高監測的靈敏度；

采用超高深度測序（100000X）結合UMI分析可以實(shí)現0.05%的突變檢測靈敏，滿(mǎn)足MRD的檢測性能要求；

基線(xiàn)分析+多次動(dòng)態(tài)監測，腫瘤診療全周期MRD動(dòng)態(tài)監控；

靈活性全周期管理，多向選擇；

適用于多種實(shí)體瘤的預后預測、復發(fā)風(fēng)險評估、療效監測。

參考文獻

[1] 非小細胞肺癌分子殘留病灶專(zhuān)家共識

[2] 微小殘留病灶檢測在實(shí)體瘤中的應用及進(jìn)展

[3] 微小殘留病灶在非小細胞肺癌中的研究進(jìn)展與應用

[4] 實(shí)體瘤分子殘留病灶（MRD）檢測共識

[5] MRD檢測行業(yè)報告（2023）

[6] Cancer Discov 2021 Dec 1;11(12):2968-2986.

[7] Cancer Cell. 2023 Oct 9;41(10):1749-1762.e6.

[8] Signal Transduct Target Ther 2023 Dec 6;8(1):442.

[9] AEur Urol. 2022 Aug;82(2):212-222.

[10] PLoS Med 2021 Aug 31;18(8):e1003741.

[11] Cancer Cell. 2023 Jun 12;41(6):1091-1102.e4.

[12] 胃癌分子殘留病灶檢測與臨床應用中國專(zhuān)家共識（2023版）

[15] Nature. 2023;616(7957):553-562.

[16] Clin Cancer Res. 2019;25(23):7058-7067.

[17] Nature 2023 Jul;619(7969):259-268.

[18] Cancer Cell 2023 Oct 9;41(10):1763-1773.e4.

[20] Nat Med 2023 Jan;29(1):127-134.

[21] JAMA Oncol 2024 Jul 1;10(7):932-940.

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